محیط کشت نیترات آگار(نام لاتین: Nitrate Agar)همانطور که می دانید طیف وسیعی از محیط کشت ها وجود دارد که برای غنی سازی، جداسازی، کشت و نگهداری میکروارگانیسم ها مورد استفاده قرار می گیرند. هر کدام از این محیط ها برای آزمایش عقیم سازی محیط ها و گاهی کاربرد همه منظوره برای کشت انواع مختلفی از میکروارگانیسم‌ها دارند. آنها همچنین برای تست عقیمی کپک ها و باکتری های مطابق با استانداردهای USP و EP استفاده می شوند. که محیط کشت نیترات آگار نیز یکی از این نوع از محیط کشت ها است که در فروشگاه انلاین آوان آزما موجود و به دو طریق می توانید برای خرید آن اقدام کنید روش اول و سنتی آن خرید از طریق حضور در دفتر فروشگاه و در روش به روزتر که اغلب افراد نیز از این روش استفاده می کنند روش اینترنتی می باشد.
محیط کشت Nitrate Agar چیست
نیترات آگار مطابق با فرمول منتشر شده در مطالعه جامعه فرهنگ ناب باکتری های طبق بررسی های باکتری شناس آمریکایی مورد مطالعه و به جامعه علمی عرضه شده است.
طبق مطالعات انجام شده توانایی کاهش نیترات برای افتراق و شناسایی انواع مختلف باکتری ها به ویژه خانواده انتروباکتریاسه ارزشمند است و نتیجه این که تخمیر کننده ها و سایر باسیل های گرم منفی متفرقه توانایی آنها در کاهش نیترات ها متفاوت هستند
برخی از اعضای این گروه قابلیت نیترات زدایی را دارند که کاهش نیترات به گاز نیتروژن برای باسیل های گرم منفی تخمیر کننده گلوکز، تولید گاز نیتروژن از نیترات یک آزمون دیفرانسیل مهم است
نیترات پتاسیم در محیط به عنوان بستری برای تعیین کاهش نیترات توسط باکتری ها عمل می کند. باکتری های خاصی نیترات به نیتریت، آمونیاک یا گاز نیتروژن تبدیل می شوند. وجود نیتریت ها را می توان با افزودن ۰٫۵ میلی لیتر اسید سولفانیلیک (R015) و محلول آلفا نفتیلامین (R009) به هر یک از آنها تشخیص داد ایجاد رنگ بنفش قرمز به دلیل تشکیل یک رنگ دیازونیوم قرمز، یعنی p-sulfobenzene-azo-a-naphthylamine، نشان دهنده کاهش نیترات به نیتریت است. اگر رنگ نداشت به این معنی که یا نیترات کاهش نمی یابد یا کاهش بیشتر به آمونیاک یا گاز نیتروژن صورت گرفته است. این می تواند با افزودن مقداری گرد و غبار روی به لوله تأیید شود. روی نیترات را به نیتریت کاهش می دهد و در نتیجه رنگ آن قرمز می شود. رنگ قرمز نشان می دهد که نیترات هنوز وجود دارد و قبلا کاهش نیافته است. عدم وجود رنگ قرمز پس از افزودن گرد و غبار روی نشان می دهد که نیترات وجود ندارد و در نتیجه نیترات بیشتر از نیتریت کاهش یافته است. بنابراین آزمایش کاهش نیترات است با وجود یک محصول نهایی کاتابولیک یا عدم وجود نیترات در محیط مشهود است.
اعضای انتروباکتریاسه مشخصاً نیترات را به نیتریت کاهش می دهند که با اسید سولفانیلیک و N, Ndimethyl-1-naphthylamine واکنش می دهد و رنگ قرمز ایجاد می کند. این واکنش به واکنش گریس معروف است. اگر یک موجود زنده به سرعت رشد کند و نیترات به طور فعال کاهش می دهد، آزمایش باید بعد از یک دوره کمون اولیه انجام شود زیرا نیتریت ممکن است بیشتر شود و به نیتروژن کاهش می یابد.
توجه: کاهش نیترات یک آزمایش تاییدی نیست. شناسایی کامل باکتری ها باید شامل مورفولوژی گرم و واکنش آزمایشات بیوشیمیایی و سرولوژیکی می باشد. افزودن روی اضافی ممکن است منجر به واکنش منفی کاذب شود. همچنین در طول انجام آزمایش کاهش نیترات با a-نفتیلامین، رنگ تولید شده در واکنش مثبت ممکن است به سرعت محو شود.
کاربرد محیط کشت نیترات آگار
کاربرد محیط کشت نیترات آگار محیطی است برای تمایز باکتری های گرم منفی هوازی و بی هوازی اختیاری با استفاده از آزمایش کاهش نیترات.
ترکیبات محیط کشت Nitrate Agar
نحوه آماده سازی محیط کشت نیترات آگار
۲۱ گرم از پودر محیط کشت را در ۱۰۰۰ میلی لیتر آب تصفیه شده یا مقطر حل کنید.
ترکیب را حرارت دهید تا به جوش آید و محیط کاملا حل شود.
محلول را در لوله ها توزیع کنید
با اتوکلاو کردن با فشار ۱۵ پوند ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید.
اجازه دهید تا لوله ها در حالت مایل تا دمای ۴۵-۵۰ درجه سانتیگراد خنک شوند
نکته:مایه تلقیح آزمایش را به صورت آسپتیک در قسمت شیب دار قرار دهید و در شرایط مناسب آزمایش کنید.
انواع نمونه محیط کشت Nitrate Agar
میکروارگانیسم های جدا شده از نمونه های بالینی و غیر بالینی
برای میکروارگانیسم‌های جدا شده نمونه‌ها: از تکنیک‌های مناسب برای جابجایی نمونه‌ها مطابق با دستورالعمل تعیین شده پیروی می‌کنند
نکته: پس از استفاده مواد آلوده باید قبل از دور ریختن با اتوکلاو استریل شوند.
هشدار و اقدامات احتیاطی محیط کشت نیترات آگار
- محیط کشت برای استفاده و آزمایش در محیط آزمایشگاهی مورد استفاده قرار می گیرد.
- لوله های دارای درپوش محکم و باید با احتیاط باز شوند تا سبب شکسته شدن شیشه و آسیب به آن نشوند.
- تکنیک های آسپتیک و اقدامات احتیاطی تعیین شده در برابر خطرات میکروبیولوژیکی را در تمام مراحل رعایت کنید.
- پس از مصرف لوله های آماده ظروف نمونه و سایر مواد آلوده باید قبل از دور ریختن با اتوکلاو استریل شوند.
.
محدودیت های محیط کشت Nitrate Agar
کاهش نیترات یک آزمایش تاییدی نیست. شناسایی کامل باکتری ها باید شامل مورفولوژی، واکنش، آزمایشات بیوشیمیایی و سرولوژیکی گرم باشد
افزودن روی اضافی ممکن است منجر به واکنش منفی کاذب شود. همچنین در حین انجام آزمایش احیای نیترات با آنافتیلامین رنگ تولید شده در واکنش مثبت ممکن است به سرعت محو شود.
عملکرد و ارزیابی محیط کشت نیترات آگار
انتظار می رود زمانی عملکرد محیط خوب و مناسب باشد که مطابق دستورالعمل روی برچسب در دوره انقضا و دمای توصیه شده استفاده شود.
کنترل کیفیت محیط کشت Nitrate Agar
ظاهر: پودر خامه ای تا زرد همگن با جریان آزاد
ژل کردن: سفت، قابل مقایسه با ژل آگار ۱٫۲٪.
رنگ و شفافیت محیط آماده شده: کهربایی روشن ژل شفاف تا کمی مادی در لوله ها به صورت مایل تشکیل می شود
واکنش: واکنش محلول آبی ۲٫۱% w/v در دمای ۲۵ درجه سانتی گراد. pH: 0.2±۶٫۸
۶٫۶۰-۷٫۰۰ :pH
پاسخ فرهنگی: خصوصیات فرهنگی پس از انکوباسیون در دمای ۳۵ – ۳۷ درجه سانتیگراد به مدت ۱۸ – ۲۴ ساعت مشاهده شد. کاهش نیترات با افزودن ۰٫۵ میلی لیتر سولفانیلیک اسید (R015) و ۰٫۵ میلی لیتر محلول œ-naphthylamine (R009) مشاهده شده .
ذخیره سازی و ماندگاری محیط کشت نیترات آگار
- پودر محیط کشت در دمای ۳۰-۱۰ درجه سانتیگراد در ظرف دربسته نگهداری شود
- محیط آماده شده در دمای ۸-۲ درجه سانتیگراد نگهداری شود.
- قبل از تاریخ انقضا روی برچسب محیط را استفاده کنید.
- درب بطری را پس از هر با مصرف محکم بسته و در جای خشک و خنک نگهداری شود تا از تشکیل توده های ناشی از رطوبت آن جلوگیری شود.
- به دلیل ماهیت رطوبت سنجی محصول نگهداری نامناسب محصول ممکن است منجر به تشکیل توده شود به همین دلیل باید در خشک نگهداری شود
- محصول را در مکانی با تهویه محافظت شده از دمای شدید و منابع قابل اشتعال ظرف را پس از استفاده محکم ببندید.
- بهترین عملکرد محصول در صورتی است که در دوره انقضای مشخص شده استفاده شود.
نحوه دفع ایمن زباله محیط کشت Nitrate Agar
- باید با اتوکلاو کردن و یا سوزاندن فرآورده های استفاده شده یا غیرقابل استفاده این محصول از دفع ایمن آن اطمینان حاصل کند.
- با دنبال کردن رویه های آزمایشگاهی مناسب روشی برای دفع مواد عفونی و موادی که با بالینی در تماس هستند ایجاد کرد
- نمونه باید مطابق با تکنیک های آزمایشگاهی فعلی ضد آلودگی و دفع شود.
قیمت محیط کشت نیترات آگار
اگر بدنبال استعلام قیمت این نوع از محصول در فروشگاه آوان آزما هستید خدمت شما عرض می کنم که در این مجموعه انواع مختلفی از محیط کشت ها و مواد شیمیایی با برندها و مارکهای داخلی و خارجی به صورت عمده و جزیی به فروش می رسد که با توجه به عوامل تاثیر گذار در قیمت برای دریافت لیست قیمت این محصول می توانید علاوه بر روش حضوری از طریق شماره های مندرج در وب سایت به صورت آنلاین با همکاران ما در ارتباط بوده تا علاوه بر دریافت لیست قیمت ،قیمت نهایی محصول و اطلاعات تکمیلی در مورد این نوع از محصول را نیز دریافت کنید.ضمنا در روزهای تعطیل و ساعات غیر اداری نیز از طریق پشتیبان واتساپ می توانید پیگیر خرید خود شوید.
